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肌苷酸二钠

返回>来源:未知   发布时间:2019-08-16 01:25    关注度:

  纯度:98% 包装消息:100G;1G;25G;5G 备注:化学试剂、精细化学品、医药两头体、材料两头体

  ADI不作特殊划定(FAO/WHO,2001)。

  14.4g/kg(大鼠,经口)。

  0.1%~1.0%饲料量慢性试验豢养大鼠6个月后,体重添加,血浆、肝、肾、脾、睾丸、心、肺等分量及组织均无非常现象。平安性高。可平安用于食物(FDA,§172.535,2000)。

  EEC—HACSG划定不得用于婴幼儿食物。

  无色至白色结晶,或白色结晶性粉末。平均含7.5个分子的结晶水。无臭,有特殊味道。味觉阈值0.012%。不潮解。熔点不较着,180℃时呈褐色,230℃摆布时分化。性不变,在一般食物加工前提下(Ph值为4~7)、100℃加热1h无分化现象。与L-谷氨酸钠对美味有相乘效应(如以肌苷酸钠与L-谷氨酸钠之比为1:7,即有较着加强美味的结果)。其盐酸溶液的最大接收波长为250nm士2nm。遇动动物中磷酸酯酶可分化而得到美味。44℃起头得到结晶水,120℃以上成无水物。易溶于水(13g/100ml,20℃),水溶液呈中性,微溶于乙醇,几乎不溶于。

  天然品具有于鲔鱼等中。

  美味剂。如在酱油中插手5~10万分之一,即呈特殊美味。一般均与味精、鸟苷酸钠等合用,以提高增鲜结果。

  肌苷酸钠液时国表里答应利用的呈味剂,较少零丁使用,常与味精一路夹杂利用,混用时美味有相乘的感化。我国划定可用于各类饲料、食物添加剂,按出产需要适量利用。

  肌苷酸钠也是国表里答应利用的呈味剂,零丁使用较少,常与味精夹杂一路利用,混用时美味有相乘的感化。我国划定可用于各类食物,按出产需要适量利用。

  次要用于各类缘由惹起的白细胞削减和急慢性肝病。

  方式一、肌苷酸脱磷酸法

  肌苷酸二钠的制备 棒状杆菌269发酵,发酵液去菌体,吸附,洗脱,浓缩,加乙醇,pH7-7.5前提下结晶可得肌苷酸二钠。

  棒状杆菌269[发酵]→发酵液[去菌体,吸附,洗脱,浓缩]→浓缩液[乙醇]→[pH7-7.5]肌苷酸二钠

  肌苷粗品的制备 在乙酸缓冲液中,调pH5.4-5.6,加压137-147kPa,脱磷酸5h,可得肌苷粗品。

  肌苷酸二钠[乙酸,加压]→肌苷

  精制 蒸馏水消融,pH=6,重结晶,可得精品。

  方式二、一步发酵法

  菌株选育 变异芽孢杆菌7171-9-1移接到斜面培育基上,30-32℃培育48h。斜面培育基成分为葡萄糖1%,卵白胨0.4%,酵母浸膏0.7%,牛肉浸膏1.4%,琼脂2%,在pH7、120℃灭菌20min。

  变异芽孢杆菌7171-9-1[斜面培育]→[30-32℃, 48h]菌种斜面

  一级种子:培育基成分为葡萄糖2%,卵白胨1%,酵母浸膏1%,玉米浆0.5%,尿素0.5%,氯化钠0.25%。灭菌前pH 7,用1L三角瓶装150ml培育基,115℃灭菌15min。每个三角瓶中接入白金耳饰菌苔,在来去式摇床上,32℃±1℃培育18h。

  发酵 50L不锈钢尺度发酵罐,定容体积35L。培育基成分为淀粉水解糖10%,干酵母水解液1.5%,豆饼水解液0.5%,尿素0.4%,硫酸镁0.1%,氯化钾0.2%,磷酸氢二钠0.5%,硫酸铵1.5%,无机硅油0.05%。pH=7,接种量0.9%,32℃±1℃培育93h,搅拌速度320r/min,通风量1:0.5V/(V·min)。500L发酵罐,定容体积350L。培育基成分为淀粉水解糖10%,干酵母水解液1.5%,豆饼水解液0.5%,硫酸铵1.5%,硫酸镁0.1%,氯化钾0.2%,磷酸氢二钠0.5%,碳酸钙1%,无机硅油小于0.3%。pH=7,接种量7%,32℃±1℃培育75h,搅拌速度230r/min,通风量1:0.25V/(V·min)。

  提取、吸附、洗脱 将发酵液30-40L 调pH=2.5-3,连同菌体通过2个串联的3.5kg 732H树脂柱吸附。用相当于树脂总体积3倍的pH 3水洗1次,把两柱分隔,用pH 3水把肌苷洗脱下来,再经769活性炭柱吸附肌苷,先用2-3倍体积的水洗涤,再用70-80℃水洗,70-80℃,1mol/L氢氧化钠溶液浸泡30min,最初用0.01mol/L氢氧化钠溶液洗脱肌苷,收集洗脱液,线放置,过滤,得粗品。

  精制 将粗品配成5%-10%的溶液,加热消融,抽滤,冷却,过滤,少量水洗,烘干,即得肌苷精成品。

  肌苷粗品[蒸馏水]→[重结晶]肌苷成品。

  核糖核酸(RNA)水解法

  细胞中含有核糖核酸和脱氧核糖核酸(DNA),而RNA水解可得4种核苷酸:腺苷酸、鸟苷酸、胞苷酸和尿苷酸,此中鸟苷酸和由腺苷酸转化而来的肌苷酸是呈味物质。核苷酸有2’-核苷酸、3’-核苷酸和5’-核苷酸,此中只要5’-核苷酸即5’-鸟苷酸和5’-肌苷酸具有呈味机能。

  RNA的提取常以RNA含量较高的酵母(最为常用)和白地霉细胞(含RNA4~11%)为原料,采用稀碱液抽提。将酵母干细胞用水配成5%~10%的悬浮液,插手氢氧化钠使其质量分数达1%;在20℃下搅拌30~45min,再用6mol/L的盐酸中和至Ph=7.0;加热至900c时保温10min,以杀灭霉菌,再冷却至2~4℃静置2~3d;取上层清液用6mol/L的盐酸调Ph值至2.5(RNA等电点),在2~4℃静置留宿;过滤得RNA,并用乙醇洗涤、干燥得RNA含量60%~70%的产物,产率4%~5%。酵母细胞也可在6%、8%的盐酸中浸提。

  RNA水解 在30℃下将橘青霉菌ThoM的紫外线L含有强力核酸酶P1(5’-磷酸二酯酶)的抽提液;将400mL酶液插手10L0.8%的RNA溶液中,调Ph值为5.6,并在65℃下反映2h,得夹杂核苷酸(腺苷酸0.22%、鸟苷酸0.19%、尿苷酸0.18%和胞苷酸0.14%)。

  核苷酸的分手 操纵各类核苷酸具有分歧的等电点,用强碱性阴离子互换树脂来分手。将上述核苷酸夹杂液调Ph值至8,用国产717树脂上柱吸附,再顺次用0.02mol/L甲酸、0.15mol/L甲酸、0.01mol/L甲酸-0.05mo1/L I甲酸钠和0.1 mol/L甲酸-0.1 mol/L甲酸钠洗脱,别离获得胞苷酸、腺苷酸、尿苷酸和鸟苷酸。

  从腺苷酸制备肌苷酸钠 在30℃下用麸皮培育米曲霉48h,加10倍的水浸泡3h,得脱氨酶液;在腺苷酸液中插手10%的脱氨酶液,并在50~60℃和Ph=6下反映3h;加热至100℃以杀酶,过滤,取清液真空浓缩、结晶得产物肌苷酸二钠。

  发酵法出产5L肌苷酸钠

  出产中次要采用的发酵法为葡萄糖间接发酵法,或葡萄糖发酵出产肌苷,再磷酸化生成肌苷酸。

  间接发酵法——一步法 以葡萄糖为碳源,异变株或产氨短杆菌为出产菌,间接发酵出产肌苷酸。

  二步法 以60~70g/L的葡萄糖为碳源,以枯草芽孢杆菌为出产菌,在30~32℃、Ph=5~7下发酵80h出产肌苷;肌苷再与磷酸三乙酯反映生成肌苷酸。

  1核糖核酸(RNA)水解法

  细胞中含有核糖核酸和脱氧核糖核酸(DNA),而RNA水解可得4种核苷酸:腺苷酸、鸟苷酸、胞苷酸和尿苷酸。此中鸟苷酸和由腺苷酸转化而来得肌苷酸是呈味物质。核苷酸有2’-、3’-和5’-核苷酸,此中只要5’-核苷酸即5’-鸟苷酸和5’-肌苷酸具有呈味机能。(1)RNA的提取。常以RNA含量较高的酵母(最为常用)和白地霉细胞(含RNA4%-11%)为原料,采用稀碱液抽提。将酵母干细胞用水配成5%-10%的悬浮液,插手氢氧化钠使其质量分数达1%;在20℃下搅拌30-45min,再用6mol/L的盐酸中和至PH=7.0,加热至90℃时保温10min,以杀灭霉菌,再冷却至2-4℃静置2-3天;取上层清液用6mol/L的盐酸调PH至2.5(RNA等电点),在2-4℃静置留宿;过滤得RNA,并容乙醇洗涤、干燥得RNA含量60-70%的产物,产率4%-5%酵母细胞也可在6%-8%的盐酸中浸提。

  (2)RNA水解。在30℃下将橘青霉素ThoM的紫外线L含有强力核算酶P1(5’-磷酸二酯酶)的抽提液;将400mL酶液插手10L0.8%的RNA溶液中,调PH为5.6,并在65℃下反映2h,得夹杂核苷酸(腺苷酸0.22%、鸟苷酸0.19%和胞苷酸0.14%)。

  (3)核苷酸的分手。操纵各类核苷酸具有不划一电的性质,用强碱性阴离子互换树脂来分手。将上述核苷酸夹杂液调PH至8,用国产717树脂上柱吸附,再顺次用0.02mol/L甲酸、0.15mol/L甲酸、0.01mol/L甲酸+和0.1mol/L甲酸+0.1mol/L甲酸钠洗脱,别离获得胞苷酸、腺苷酸、尿苷酸和鸟苷酸。

  (4)从腺苷酸制备肌苷酸钠。在30℃下用麸皮培育米曲霉48h,加10倍水浸泡3h,得脱氨酶液;在腺苷酸液中插手10%的脱氨酶液,并在50-60℃和PH=6下反映3h;加热至100℃以杀酶,过滤,取清液真空浓缩、结晶得产物肌苷酸二钠。

  2 发酵法出产5’-肌苷酸钠

  出产中采用的发酵法次要为葡萄糖间接发酵法,或葡萄糖家教出产肌苷,再磷酸化生成肌苷酸。

  (1)间接出产发酵—— 一步法。以葡萄糖为碳源,异变株或产氨短杆菌为出产菌,间接发酵出产肌苷酸。

  (2)二步法。以60-70g/L的葡萄糖为碳源,以枯草芽孢杆菌为出产菌,在30-32℃、PH=5-7下发酵80h出产肌苷;肌苷再与磷酸三乙酯反映生成肌苷酸。

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